Expression d'une enzyme Cu

Expression d'une enzyme (Cu, Zn superoxyde dismutase) typique de la forme familiale de la sclérose latérale amyotrophique accroît la vulnérabilité des cellules de neuroblastome aux infections

Miriam Goos  Miriam Goos  ,Wolf-Dieter Zech  , Wolf-Dieter Zech  ,Manoj Kumar Jaiswal Manoj Kumar Jaiswal  ,Saju Balakrishnan  , Saju Balakrishnan Sandra Ebert  , Sandra Ebert Timothy Mitchell  , Timothy Mitchell Maria Teresa Carrì  , Maria Teresa Carrì ^,Bernhard U Keller , Bernhard Keller  U Roland Nau  Et Roland Nau

Résumé

Contexte

Les infections peuvent aggraver l’évolution des maladies neurodégénératives, comme la sclérose latérale amyotrophique (SLA). Des mutations dans l’enzyme anti-oxydante, Cu, Zn superoxyde dismutase (EC 1.15.1.1, SOD1), sont associées à la SLA familiale. Le Streptocoque pulmonaire, le plus fréquent des agents pathogènes respiratoires, provoque des dommages par l'action d’un facteur de virulence lié au cholestérol, pneumolysin , et par la stimulation du système immunitaire, notamment via « Toll-like receptor-2« .

Méthodes

Les cellules neuroblastome SH-SY5Y combinées avec la mutation G93A de SOD1 typique de la forme familiale de SLA (G93A-SOD1) et les cellules neuroblastome SH-SY5Y combinées avec « wildtype » SOD1 étaient à la fois exposés à pneumolysin et dans des co-cultures avec les macrophages humains traités avec le « the Toll like receptor 2 agonist N-palmitoyltransférase-S-[2,3-bis (palmitoyloxy) - (2RS)-propyl] - [R]-cysteinyl-[S]-séryl-[S]-lysyl-[S]-lysyl - [S]-lysyl-[S]-lysyl-[S]-lysine × 3 HCl (Pam ₃ CSK _4). La viabilité cellulaire et la mort des cellules apoptotiques ont été comparés par morphologie et in-situ des résidus. With the help of the WST-1 test, cell viability was quantified, and by measurement of neuron-specific enolase in the culture supernatant neuronal damage in co-cultures was investigated. Avec l'aide de l’essai WST-1 , la viabilité cellulaire a été quantifiée, et par mesure de la neuron-specifique enolase dans la culture de liquide surnageant, les dommages neuronaux dans des co-cultures a été étudié. Les taux de calcium intracellulaire ont été mesurés en utilisant l'analyse par fluorescence fura-2 AM.

Résultats

Les cellules neuroblastome SH-SY5Y combinées avec la mutation G93A de SOD1 typique de la forme familiale de SLA (G93A-SOD1) sont plus vulnérables à l'action neurotoxique du pneumolysin et à l'attaque des monocytes stimulés par Pam ₃ CSK ₄ que les cellules SH-SY5Y combinées avec des espèces sauvages de type humain SOD1. Le renforcement de la toxicité du pneumolysin dans les cellules neuronales G93ASOD1 dépendait de l'incapacité de ces cellules pour faire face à un afflux accru de calcium causée par des pores formés par pneumolysin. Cette incapacité a été causé par une diminution de la capacité des mitochondries à éliminer le calcium cytoplasmique. Le traitement des cellules neuroblastome G93A-SOD1 SH-SY5Y avec l'antioxydant N-acétylcystéine réduit la toxicité du pneumolysin.

Conclusion

La vulnérabilité particulière des cellules neuronales G93A-SOD1 à hemolysins et à l'inflammation peut être en partie responsable de la détérioration clinique des patients SLA pendant les infections. Ces constatations montrent le lien entre l'infection et la maladie du motoneurone ,et propose le traitement précoce des infections respiratoires des patients SLA.

Vertaling: Christophe Palm